狠狠综合亚洲综合亚洲色丨国产免费久久精品国产传媒丨天天爽夜夜爽夜夜爽精品视频丨无码av天堂一区二区三区丨av激情亚洲男人的天堂

1.基本原理 
將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過程稱為轉(zhuǎn)化（ Transformation ）。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀（感受態(tài)細(xì)菌的制備，見前）。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面，經(jīng) 42℃ 短時(shí)間熱沖擊處理，促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物。在豐富培養(yǎng)基上生長(zhǎng)數(shù)小時(shí)后，球狀細(xì)胞復(fù)原并分裂增殖。被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中，外源基因得到表達(dá)。在選擇性培養(yǎng)平板上，可選出所需的轉(zhuǎn)化子（即含有質(zhì)粒 DNA 的細(xì)菌）。鈣處理的感受態(tài)細(xì)胞，一般每微克 DNA 能獲得 10 5 ～ 10 6 個(gè)轉(zhuǎn)化子。除化學(xué)方法轉(zhuǎn)化細(xì)菌外，還有電穿孔法（ Electroporation ），其轉(zhuǎn)化率可高達(dá) 10 9 ～ 10 10 個(gè)轉(zhuǎn)化子 /μg 質(zhì)粒 DNA 。

2.器材 

①培養(yǎng)皿  ②恒溫培養(yǎng)箱

3.試劑 

① LB 培養(yǎng)基

②選擇性 LB 瓊脂培養(yǎng)平板（含氨芐青霉素，終濃度為 50μg/ml ）

③氨芐青霉素 100 mg/ml

④宿主細(xì)菌：經(jīng) 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態(tài)細(xì)菌 DH5α

4.操作步驟 

①取 50 μL 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，加入適量質(zhì)粒（體積不得超過 4 μL ）冰浴 30 min 后， 42℃ 熱激 90 s ，馬上放回冰上，冰浴 2 min ；
②加 400 μL LB 培養(yǎng)基，于 37℃ 搖床慢搖振蕩培養(yǎng) 45-60 min ；
③取 50-100 μL 涂在含有氨芐青霉素（ 100 μg/mL ）的 LB 固體培養(yǎng)基上， 37℃ 倒置培養(yǎng)過夜。

上海恒遠(yuǎn)以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫(kù)存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格，所有這些保證了我們向您提供的專業(yè)優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。*，所有ELISA試劑盒均以超低折扣價(jià)讓利客戶，全程免費(fèi)技術(shù)指導(dǎo)，提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎新老客戶來(lái)dian咨詢?cè)斍椤?/span>