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 ELISA方法被廣泛用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在臨床檢驗(yàn)中如果處理不當(dāng)，會(huì)出現(xiàn)一些錯(cuò)誤結(jié)果（即假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果）。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：（1）標(biāo)本因素；（2）操作因素；（3）試劑因素；本文主要就操作因素對(duì)ELISA測(cè)定的影響做如下討論：

操作因素

1、溫育的影響

溫育是影響ELISA測(cè)定結(jié)果的關(guān)鍵因素。溫育時(shí)間不夠，弱陽(yáng)性標(biāo)本檢測(cè)不出；溫育溫度不夠，弱陽(yáng)性標(biāo)本也難以檢出。

2、洗板的影響 

洗板對(duì)ELISA測(cè)定來(lái)說(shuō)也是關(guān)鍵步驟。洗板分手工洗板和機(jī)器洗板，一般認(rèn)為機(jī)器洗板較手工洗板效果要好，關(guān)鍵是洗板次數(shù)的選擇。洗板次數(shù)較少，造成殘留，可引起假陽(yáng)性結(jié)果；洗板次數(shù)過(guò)多，可造成抗原抗體結(jié)合物洗脫，造成假陰性結(jié)果。

3、 顯色的影響 

影響顯色的關(guān)鍵是顯色溫度和顯色時(shí)間，有些實(shí)驗(yàn)室操作人員不嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，因?yàn)閾?dān)心“花板"，往往是顯色時(shí)間不到就匆忙終止顯色，結(jié)果造成弱陽(yáng)性標(biāo)本不能顯色而導(dǎo)致假陰性發(fā)生。

4、加樣的影響 

加入樣品、試劑及混勻時(shí)間的差異稱(chēng)為操作時(shí)差。操作時(shí)差在每個(gè)試驗(yàn)中都存在，尤為手工操作更著，對(duì)結(jié)果都會(huì)產(chǎn)生或大或小的影響。ELISA常用項(xiàng)目，例如：乙肝兩對(duì)半，多是成批檢測(cè)。從加*個(gè)樣本到zui后一個(gè)樣本，包括中間換吸管尖的工作，在這一過(guò)程中有一個(gè)時(shí)間差；加試劑及混勻也同樣存在時(shí)間差，這種操作時(shí)間差會(huì)致使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間的不一致，而這種不一致可以直接導(dǎo)致誤差的產(chǎn)生，尤其是在夏天，若不合理安排時(shí)間、盡量減少時(shí)差，將會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果出現(xiàn)。

ELISA檢測(cè)法影響因素眾多，上述只是一些常見(jiàn)因素分析。要想提高ELISA檢測(cè)的檢測(cè)質(zhì)量，關(guān)鍵還要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室科學(xué)管理，強(qiáng)化標(biāo)準(zhǔn)化流程操作，加強(qiáng)質(zhì)量控制，提高人員素質(zhì)，以減少檢測(cè)假陽(yáng)性、假陰性結(jié)果的發(fā)生。

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